Milieu de terrain très polyvalent, pouvant aussi bien jouer dans l'axe que dans les couloirs gauche ou droite, Zambrotta a effectué ses débuts en équipe nationale en 1999 lors d'un match face à la Norvège. Inamovible depuis lors, il participa avec succès à l'Euro 2000 ainsi qu'au Mondial 2002. En 2000, son exclusion en demi-finale face aux Pays-Bas ne lui permit pas de prendre part à la finale. C'est, à coup sûr la plus grande déception de sa carrière.
En club, il fit ses débuts dans le club de Côme, sa ville natale, avant de prendre le chemin de Bari. Ses bonnes prestations dans le sud de l'Italie lui permirent d'obtenir un bon transfert à la Juventus. Avec les Bianconeri, il accumule depuis plusieurs années un palmarès intéréssant, palmarès qu'il espère voir étoffé avec, qui sait, une victoire de l'Italie au Portugal.